摘要:细胞角蛋白8(cytokeratin 8, ck8)是一种细胞骨架蛋白,属于角蛋白家族成员,在调控上皮细胞粘附与运动、介导免疫反应等过程中发挥重要作用。为了探究ck8在大口黑鲈(Micropterus salmoides)免疫反应中的作用,本研究利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得大口黑鲈Msck8基因的全长序列2 424 bp,其中5"非编码区有570 bp,3"非编码区有195 bp,开放阅读框有1 659 bp,可编码552个氨基酸,预测其分子量为61.30 kD,理论等电点为5.17。系统进化树中大口黑鲈与小口黑鲈Msck8蛋白聚为一支,显示了较高的同源性(99.10%)。荧光定量PCR分析显示,Msck8在健康大口黑鲈9个组织中均有表达(P<0.05),其表达量由高到低依次是心脏、肌肉、鳃、肾脏、肝脏、后肠、前肠、中肠和脾脏。经脂多糖免疫刺激后,Msck8在大口黑鲈心脏、肌肉和后肠组织中的表达量均呈时序性变化(P<0.05),心脏和肌肉中均在6 h出现表达高峰,后肠中于48 h出现表达高峰。此外,大口黑鲈经高水平豆粕饲料响应后发现,豆粕替代50%鱼粉组的Msck8基因表达水平显著低于鱼粉组(P<0.05)。综上所述,Msck8可能在鱼体抵御细菌入侵和营养调控的炎症反应中发挥重要作用。