福尔马林固定鱼类标本DNA提取方法的优化
作者:
作者单位:

1. 中国水产科学研究院 南海水产研究所, 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室, 广东 广州 510300; 2. 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306

作者简介:

孔啸兰(1986), 女, 硕士研究生, 研究方向: 渔业生态保护. E-mail: weilankong.2005@163.com

中图分类号:

Q173

基金项目:

广东省重大科技计划项目(2009B030600002); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010ZD01, 2011YD03); 广东省科技计划项目(2011B031100001); 广东省自然科学基金资助项目(9451030002002475).


Optimization of genomic DNA extraction from formalin-fixed fish specimens 
Author:
Affiliation:

1. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China

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    摘要:

    气候变化和人类活动胁迫致使许多海洋鱼类种群结构发生了显著变化。为了摸清鱼类种群结构对气候变化和人类胁迫活动的响应机理是一种有效的途径。为了解决福尔马林固定鱼类样本)研究提取产量的影响。以取样部位、除甲醛处理、消化时间、抽提方法为考察因素4

    Abstract:

    Inrecentdecades,thepopulationstructureofmanymarinefishhasdramaticallychangedundertheinfluenceofanthropogenicactivitiesandclimatechange.Tobetterunderstandthechangemechanism,DNAextractedfromformalin-fixedmarinefishspecimensisrequired.However,obtaininghighqualityDNAfromformalin-fixedspecimensisdifficult.Toobtainknowledgeforspecimensthatwerefixedin1962wereusedassamples,andanorthogonalexperimentwasdesignedfollowingtheL)table.TheDNAconcentrationwastakenastheevaluationindex.Thetissuetypes,anti-formaldehydetreatments,digestivetimesandextractionmethodsweretakenasselectionfactors.Thebestgroupwasdeterminedtobe℃anddryinginavacuumcentrifuge,3hofdigestionwithProteinaseKwithinawaterbathof55,andDNAextractionbykit.Anti-formaldehydetreatmentssignificantlyimprovedtheproductionofDNAandtheuseofvariousanti-formaldehydemethodsobtainedthebesteffect.Digestionaftera90DNAwasassessedbyPCRamplificationandsequencingthemethods

    参考文献

    [1] Hutchings J A, Reynolds J D. Marine fish population collapses: consequences for recovery and extinction risk [J]. Bioscience, 2004, 54: 297–309.

    [2] Tonn W M. Climate change and fish communities: a conceptual framework [J]. Trans American Fish Soc, 1990, 119: 337–352.

    [3] Jennings S, Greenstreet S P R, Reynolds J D. Structural change in an exploited fish community: a consequence of differential fishing effects on species with contrasting life histories [J]. J Anim Ecol, 1999, 68: 617–627.

    [4] 庞峻峰, 张亚平. 标本DNA研究进展[J]. 动物学研究, 2001, 22(6): 490-496.

    [5] Orlando VParo R. Mapping polycomb-repressed domains in the bithorax complexusing in vivo formaldehyde cross-liked chromatin[J]. Cell, 1993, 75: 1187–1198.

    [6] Kaufman BA, Newman SM, Hallberg RL, et al. In organelle formaldehyde crosslinking of proteins to mtDNA: identification of bifunctional proteins [J]. Proc Natl Acad Sci, 2000, 97: 7772–7777.

    [7] Jackson V. Studies on histone organization in the nucleosome using formaldehyde as a reversible cross-linking agent [J]. Cell, 1978, 15: 945–954.

    [8] Paabo S. Molecular cloning of ancient Egyptian mummy DNA[J]. Nature, 1985, 314: 644 –645. 

    [9] 徐来祥, 张知彬, 宋铭晶. 福尔马林保存的动物标本基因组 DNA 的提取方法[J]. 动物学报, 2002, 48(2): 264– 269.

    [10] Arrighi F E, Bergendahl J, Mandel M. Isolation and characterization of DNA from fixed cells and tissues [J]. Exper Cell Res, 1968, 50: 47–53.

    [11] 夏颖哲, 张春光, 陈宜瑜. 福尔马林保存鱼类标本中大片段 DNA的提取[J].水生生物学报, 2007, 31(4): 485-491.

    [12] 王丹, 谭德清, 童金苟. 福尔马林固定铜鱼基因组DNA 的提取与扩增[J]. 生态学杂志, 2009, 28(3): 572–576.   

    [13] Shiozawa D K, Kudo J, Evans R P, et al. DNA extraction from preserved trout tissue [J]. Great Basin Naturalist, 1992, 52(1): 81–87.

    [14] Gilbert M T, Haselkorn T, Bunce M, et al. The isolation of nucleic acids from fixed, paraffin-embedded tissues-which methods are useful when? [J]. PLoS One, 2007, 2(6): e537. 

    [15] 肖武汉, 吴春花, 宿兵. 福尔马林固定云南鲴DNA提取及其细胞色素b基因序列分析[J]. 动物学研究, 1997, 18(3): 252–258.

    [16] Bentzen P, Shedlock A, Haygood M, et al. Enhanced DNA extraction and PCR amplification of mitochondrial genes from museum specimens [J]. Biotechniques, 1997, 22(3): 394–400. 

    [17] Fang S G, Wan Q H, Fujihara N. Formalin removal from archival tissue by critical point drying[J] . Biotech-niques, 2002, 33: 604, 606, 608–610.

    [18] Sambrook JFritsch E FManiatis T.Molecular cloning:a laboratory manualnded [M].New York: Cold Spring Harbor Labortory Press, 1989: E3-E7  

    [19] Shui BN, Han ZQ, Gao TX et al. Mitochondrial DNA variation in the East China Sea and Yellow Sea populations of Japanese Spanish mackerel Scomberomorus niphonius[J]. Fish Sci 200975: 593600.

    [20] Wu L, Patten N, Yamas H C, et al. Extraction and amplification of DNA from formalin-fixed, paraffin-embeded tissues[J]. Appl Immunohis tochem Mol Morphol, 2002, 10: 269–274. 

    [21] Warford A, Pringle J H, Hay J, et a1. Southern blot analysis of DNA extracted from formal-saline fixed and paraffin wax-embedded tissue[J]. J Patho11988154(4): 313–320.

    [22] Banerjee S K, Makdisi W F, Weston A P, et al. Optimisation of DNA and RNA extraction from archival formalin-fixed tissue[J]. Biotechniques, 1995, 18: 768–773.

    [23] Handt O, Hoss M, Krings M, et al. Ancient DNA: methodological challenges[J]. Cell Mol Life Sci, 1994, 50(6): 524– 529.

    [24] 

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引用本文

孔啸兰,陈作志,林琳,李纯厚,梁沛文.福尔马林固定鱼类标本DNA提取方法的优化[J].中国水产科学,2012,19(6):1068-1073
KONG Xiaolan, CHEN Zuozhi, LIN lin, LI Chunhou, LIANG Peiwen. Optimization of genomic DNA extraction from formalin-fixed fish specimens [J]. Journal of Fishery Sciences of China,2012,19(6):1068-1073

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  • 在线发布日期: 2012-11-21
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