草鱼CDK2基因的克隆、与CDX2的相互作用及表达调控研究
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长沙学院生物与化学工程学院

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中图分类号:

S917??????

基金项目:

国家自然科学(U21A20267/31902345);湖南省自然科学基金面上项目(2023JJ30075);湖南省教育厅重点项目(22A0597); 湖南省领军人才计划(2023RC1072);湖南省现代农业产业技术体系 (HARS-07).


Molecular cloning, interaction with CDX2 and expression regulation of CDK2 in grass carp (Ctenopharyngodon idella)
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Hunan Provincial Key Laboratory of Nutrition and Quality Control of Aquatic Animals,Department of BiologicaLand Chemical Engineering,Changsha University

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    为探讨草鱼(Ctenopharyngodon idella) cdk2的分子特征、CDK2蛋白与CDX2的相互作用及其表达营养调控, 本研究通过克隆获得草鱼cdk2基因序列, 其开放阅读框897 bp, 编码298个氨基酸, 与其他物种CDK2氨基酸序列同源性达到80%以上, 且具有保守S_TKc功能域; 基于cdk2的密码子偏好性及聚类分析均表明, 草鱼与斑马鱼(Danio rerio)的亲缘关系最近; 相对基于cdk2 RSCU的聚类分析, 基于CDK2氨基酸序列的系统进化树分析更符合传统物种的分类; 组织表达分析结果表明, 草鱼cdk2 mRNA在血液组织表达水平最高(P<0.05), 肝脏和脾脏次之。通过分子对接和酵母双杂交分析了草鱼CDK2与其下游磷酸化底物蛋白CDX2的相互作用, 结果表明草鱼CDK2与CDX2具有相互作用。本研究进一步通过养殖实验探究了饲料中添加不同水平的游离氨基酸CAA(游离lys和Glu)、二肽KE (Lys-Glu, KE), 三肽GHK (Gly-His-Lys, GHK)对cdk2的表达调控, 结果表明, 相比对照组, 0.5% GHK对草鱼cdk2 mRNA的表达促进作用最大, 氨基酸CAA相比具有同样氨基酸组成的KE二肽, 更能促进cdk2的表达。综上所述, 草鱼cdk2基因表达具有组织特异性, CDK2与CDX2相互作用, cdk2表达水平受到饲料中氨基酸和小肽水平的影响。本研究为其他硬骨鱼类cdk2分子特征的研究, 鱼类肠道功能基因的调控机制探索研究提供新的线索, 并为后续开展cdk2基因调控氨基酸及小肽的转运吸收分子机制研究提供理论基础。

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  • 收稿日期:2025-02-07
  • 最后修改日期:2025-03-31
  • 录用日期:2025-04-01
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