摘要:本研究旨在从南极磷虾中筛选克隆获得胰白蛋酶基因 EsTRY,构建重组表达载体 EsTRY-pCold-SUMO,在大肠杆菌中实现高效异源表达,揭示该酶对邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)的降解活性。南极磷虾胰蛋白酶 EsTRY 基因长 1350 bp,编码 449 个氨基酸,理论分子量(MW)为 47040.35 Da,理论等电点(pI)为 4.90。结构分析表明,EsTRY 含有典型的催化三联体 (Asp/Glu-Ser-His) 及一个底物特异性结合位点,属于丝氨酸蛋白酶家族。EsTRY 的酯酶活性达到 18973 U/mL,比酶活为 5802.15 U/mg。最适反应温度为 25 ℃,最适 pH 为 7.0。酶催化降解实验表明,EsTRY 对邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)较强的降解能力,15 min 内分别降解 13.2%、34.4%、63.5%、48.9% 的 1 mM DMP、DEP、DPRP、DBP；5 h 内降解率分别达到 39.4%、62.7%、86.8%、98.7%。本文研究了 EsTRY 对 PAEs 的降解活性,为塑化剂污染的生物治理提供了新的潜在工具,同时也为南极磷虾的高效利用与高值开发提供了科学依据。
