亚硝酸盐氧化细菌（NOB）通过氧化亚硝酸盐产生的能量生长，因此，其生长会受到初始低亚硝酸盐浓度的限制，导致生物絮团硝化作用建立速度过慢以及硝化性能不足。本文在培养生物絮团过程中添加不同浓度的亚硝酸盐溶液使各组亚硝酸盐氮（NO2--N）的初始浓度为0、2、10、50、100 mg/L，并命名为N-0、N-2、N-10、N-50和N-100，探究其对生物絮团硝化作用建立、硝化作用性能、营养组分、微生物群落的影响。培养期间水质结果显示N-50组和N-100组中的NO2--N先于其他组降至低水平，生物絮团硝化作用建立时间显著快于其他组（P ＜0.05）。氨氮去除能力的结果显示，N-100组的氨氮处理能力显著高于其他组（P ＜ 0.05）；各组粗脂肪、粗蛋白、粗灰分、脂肪酸、氨基酸含量无显著差异（P ＞0.05）；N-50组和N-100组的微生物与其他组差异显著，且与NO2-、NO3-和TN的变化相关，NO2-的影响强度最大；门水平和纲水平上，N-50组和N-100组的变形菌丰度显著降低，放线菌、绿弯菌丰度显著提高（P ＜0.05）；属水平上，N-50组和N-100组副球菌属、norank_f__Alcaligenaceae的相对丰度显著低于其他各组，谷氨酸杆菌属、Comamonas的相对丰度显著高于其他组（P ＜ 0.05）；N-50组和N-100组的amoA和hao基因表达量显著高于其他实验组，添加亚硝酸盐组的nxrA基因表达量显著升高（P ＜ 0.05），亚硝酸盐氧化能力提升。本研究表明在培养生物絮团时，添加亚硝酸盐使 NO2--N为100 mg/L能显著提高生物絮团硝化作用建立速度以及硝化性能。