摘要:为了探究DJ-1蛋白在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)应对不同病原菌感染时的免疫响应中的免疫应答机制, 本研究首先通过RACE技术克隆获得中华绒螯蟹DJ-1(EsDJ-1)基因的cDNA序列, EsDJ-1全长1635 bp, 开放阅读框(ORF)为567 bp, 编码188个氨基酸, 预测蛋白分子量大小约为19.13 kD。并进行了生物信息学分析分析, 采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测了EsDJ-1基因的组织分布情况, 以及其在常见病原菌攻毒后的表达响应。结果表明, EsDJ-1全长1635 bp, 开放阅读框(ORF)为567 bp, 编码188个氨基酸, 预测蛋白分子量大小约为19.13 kD, 结构域预测结果显示EsDJ-1含有一个PfpI结构域; 多序列比对及系统进化树分析结果显示, 且EsDJ-1在不同物种间具有较好的保守性。其次,, 实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)qRT-PCR结果显示, EsDJ-1在中华绒螯蟹各组织中均有表达, 在肠道中表达量最高, 在肌肉中表达量最低; 。最后,, 用不同的病原菌刺激后qRT-PCR结果显示, 中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)分别刺激宿主后宿主血淋巴细胞EsDJ-1的相对表达水平总体呈现先下调后上调的趋势, 中华绒螯蟹螺原体主要表现为1、3、5和7 d显著下调, 9 d和11 d显著上调; 嗜水气单胞菌主要表现为6、12和24 h显著下调, 48 h显著上调; 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)刺激后EsDJ-1的相对表达水平总体呈现先上调后下调的趋势, 主要表现为6 h和12 h显著上调, 24 h和48 h显著下调。上述结果表明, EsDJ-1参与了中华绒螯蟹应对不同病原感染的过程, 可为进一步深入研究EsDJ-1在中华绒螯蟹的先天免疫调控机制和疾病防控策略提供重要的理论基础和参考价值。