2021, Vol. 28 
2. 青岛海洋科学与技术试点国家实验室，海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，山东 青岛 266071;
3. 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306;
4. 中国农业科学院，北京 100081;
5. 莱州明波水产有限公司，山东 莱州 261400
2. Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao 266071, China;
3. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;
4. Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;
5. Mingbo Aquatic Co. Ltd., Laizhou 261400, China
青石斑鱼(Epinephelus awoara)俗名土斑，在分类学上隶属于鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼属，是一种栖息在海洋暖水性中下层的名贵鱼类，当年生长可达到120 g以上，在市场上养殖总量相对较少[1]。蓝身大斑石斑鱼(Epinephelus tukula)俗名为金钱斑，也属石斑鱼属，是已知最大的石斑鱼之一，生长速度快，成年鱼体长可达150 cm, 体重可达90 kg[2]。青石斑鱼味道鲜美，市场价格和利润较高; 蓝身大斑石斑鱼生长速度较快，第一年体重可增至2 kg, 两年后体重超过4 kg[1,3]。本研究通过精子冷冻和人工授精技术，实现了二者的杂交育种，获得了正常发育的杂交种(E. AT), 杂交种在存活率和生长速度上具有明显的杂种优势，在13月龄时E. AT的体重为(408.72±71.46) g, 而纯种仅为(129.25±41.11) g, 杂交种体色、体型也与母本相似[4], 具有较好的养殖前景。但目前仅见此杂交种骨骼发育的报道[4], 未见其他相关研究。
染色体研究对于研究鱼类的杂交育种、遗传变异以及性别决定等都具有重要意义。对杂交后代的染色体进行研究还可以为杂交育种提供基本资料，明确杂交种的进化地位[5-6]。同时，杂交鱼具有生长快、抗逆强等杂种优势，对杂交后代的染色体研究也是探究杂种优势遗传学基础的关键途径之一。目前对棕点石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交子代(E. fuscoguttatus♀×E. lanceolatus♂)[7]、云纹石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交子代(E. moara♀× E. lanceolatus♂)[8]和棕点石斑鱼♀×蓝身大斑石斑鱼♂杂交子代(E. fuscoguttatus♀×E. tukula♂)[9]均开展了染色体研究，而E. AT为新杂交种，对其染色体核型的研究还未有报道。此外，虽然青石斑鱼及蓝身大斑石斑鱼的核型已有报道[10-12], 但在鱼类中存在较多的染色体多态现象[13], 因此仍需制备E. AT父母本群体的染色体核型进行分析。
国内外已通过头肾-秋水仙素法对赤点石斑鱼(E. akaara)[10,14]、鲑点石斑鱼(E. fario)[15-16]、鞍带石斑鱼(E. lanceolatus)[17-18]、云纹石斑鱼(E. moara)[19-21]等28种石斑鱼进行了染色体标本的制作，该方法虽然较为成熟简单，但需要解剖鱼获取头肾，在种鱼和珍稀鱼类上实施代价高。而通过外周血淋巴细胞培养法制备染色体可将鱼体的伤害程度降至最低，但是难度较高。采用此方法制备鱼类染色体的研究并不普遍，目前仅在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)[22]、鲤(Cyprinus carpio)[23]、牙鲆(Paralichthys olivaceus)[24]、花鲈(Lateolabrax saponicus)[25]、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)[26]等鱼类中成功制备染色体制片。通过外周血淋巴细胞培养法制备染色体，不同的鱼种所需的植物血细胞凝集素
本研究通过头肾-秋水仙素方法制备了E. AT、青石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼的染色体核型，旨为探究杂交后代与双亲染色体组型的差异，证明青石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交在染色体水平上的可行性，以及为进一步研究石斑鱼杂交育种的遗传变异机理提供基本资料。此外，本研究通过摸索蓝身大斑石斑鱼外周血淋巴细胞培养制备染色体的条件，旨在建立较为成熟的石斑鱼外周血细胞培养制备染色体制片技术，为石斑鱼核型研究提供方法。
1 材料与方法 1.1 亲鱼精子、卵子的获取和人工授精选择在工厂化养殖环境中培育的体长50~70 cm, 体重20~30 kg的雄性蓝身大斑石斑鱼，在水温达到25~26 ℃时，挤压腹部采集精液，之后将精液与冷冻稀释液ELs-3以1∶1比例稀释，摇晃混匀。ELs-3的配方为: 1 L蒸馏水中含葡萄糖10 g, NaCl 10 g, NaHCO3 0.5 g, 小牛血清100 mL(北京索莱宝科技有限公司)。之后将装有精子的冷冻管在4 ℃冰箱中平衡5 min, 然后放入10 cm×10 cm的布袋中，将布袋放在离液氮表面约10 cm的液氮罐蒸汽中平衡10 min; 最后将布袋投入液氮(–196 ℃)中冷冻保存[27]。青石斑鱼卵子从福建省漳浦市某水产养殖场采集，亲鱼体长20~25 cm, 体重0.5~1.0 kg。当水温达23~26 ℃时，用MS- 222 (百灵威科技有限公司)麻醉选定的雌鱼，将绒毛膜促性腺激素(HCG, 200~300 IU/kg)和促性腺激素释放激素类似物(LHRH-A, 35 μg/kg)注入胸鳍基部。注射48~60 h后挤压鱼的腹部获得卵子。青石斑鱼的精子也从此养殖场获得，用MS- 222麻醉，然后挤压腹部获得精液。
卵子挤出后，分别将新鲜的青石斑鱼精子和解冻后的蓝身大斑石斑鱼冷冻精子倒入装有卵子的塑料盆中，加入高盐度海水(盐度33~35)收集上浮卵，15 h后，再次收集上浮受精卵并打包空运至所在公司，到达后将纯种和杂交种的受精卵转移到7 m3的养殖池中培育，每池约40 g, 二者培育条件相同，盐度29~30, 温度25~27 ℃, 溶解氧6~10 mg/L。
1.2 实验鱼的获得实验鱼取自山东省莱州明波水产有限公司。随机选取青石斑鱼和E. AT各10尾通过头肾-秋水仙素法制作染色体制片，体重分别为每尾10~19 g和10~13 g; 选取4条16月龄的E. AT (体重400~ 510 g) 通过头肾-秋水仙素法制备染色体制片和性腺切片，分析核型。此外，选择6尾蓝身大斑石斑鱼，体重20~25 kg, 体长50~70 cm, 通过外周血细胞培养法制备染色体制片，分析核型。
1.3 头肾-秋水仙素法制备染色体 1.3.1 注射植物血细胞凝集素(PHA)和秋水仙素实验采用对PHA体内注射法修改后的步骤[28]。向实验鱼胸腔内注射PHA溶液(北京索莱宝科技有限公司), 剂量为6 μg/g。12 h后，向其胸腔同一位置内注射秋水仙素溶液(上海吉至生化科技有限公司), 剂量为10 μg/g。
1.3.2 制备肾细胞悬液3 h后，利用MS-222 (180 mg/L)将实验鱼麻醉，用剪刀从臀鳍基部斜向上剪至出血，放血10 min后取出头肾，并用生理盐水洗涤。用剪刀将头肾完全剪碎，通过260目筛绢过滤，收集等量过滤液于两个离心管中。4月龄的青石斑鱼和E. AT为分别混合制备肾细胞悬液，16月龄的E. AT为每尾单独制备肾细胞悬液。
1.3.3 低渗处理向细胞悬液各加入3 mL 0.075 mol/L的KCl溶液，34 ℃低渗处理30 min, 并用吸管轻轻吹打沉淀细胞。
1.3.4 预固定向细胞悬液中加入新配制的卡诺氏固定液(V甲醇∶V冰醋酸=3 : 1), 补充至4.5 mL, 并放置在0 ℃冰盒内，预固定10 min。
1.3.5 固定将预固定后的细胞悬液离心10 min (4000 r/min)。倒去上清液，加卡诺氏固定液至4.5 mL, 并用吸管轻轻吹打沉淀细胞，室温下固定45 min; 再次离心后，进行第2次固定，室温下固定30 min; 再次离心后，进行第3次固定，室温下固定30 min, 固定过程中用吸管轻轻吹打沉淀细胞。第4次离心后，向细胞沉淀中加入1 mL左右卡诺氏固定液，放入冰盒中待用。
1.3.6 滴片及染色采用冷片法滴片，取干净载玻片(已在盛有无水乙醇的烧杯中预冷30 min), 吸取细胞悬液并从15~20 cm的高度在载玻片上滴1~2滴，使细胞铺展开，用酒精灯使载玻片燃起火焰使细胞固定在玻片上，室温下自然晾干，晾干后用10%吉姆萨染液染色45 min, 之后用蒸馏水冲洗，在室温下自然干燥。
1.4 外周血细胞培养法制备染色体 1.4.1 分装培养基预先将RPMI 1640完全培养基(武汉普诺赛生命科技有限公司)在无菌操作台上分装到3个密封细胞培养瓶中，每瓶加3 mL完全培养基和0.1 mL质量浓度为0.1 mg/mL的PHA, 在实验前放26.5 ℃恒温箱中预热。
1.4.2 取血用75%乙醇消毒抽血处，用0.2 mL的500 U/mL肝素钠溶液润湿针管，从尾部抽取约1 mL血液，摇匀避免凝血。之后将针管和针头用75%乙醇消毒，盖上针管。
1.4.3 培养细胞在无菌操作台中，弃去针管内先滴出的1~2滴血液，然后向3 mL细胞培养瓶中加入0.2 mL的血液，盖好瓶盖并摇匀。装有血液和培养基的细胞培养瓶置于26.5 ℃恒温箱中培养72 h (每12 h摇动一次培养瓶)。在收获前3 h加入0.1 mL浓度为0.12 mg/mL的秋水仙素。
1.4.4 收集细胞摇动培养瓶使所有细胞悬浮在培养瓶中，将所有细胞悬液倒入50 mL离心管中，轻轻吹打均匀，1000 r/min离心10 min, 轻轻吸出上清，仅留0.5 mL上清液及细胞沉淀。
1.4.5 低渗加入预热34 ℃的低渗液(0.075 mol/L) 7 mL, 轻轻吹打沉淀使其形成细胞悬液，在34 ℃恒温培养箱中低渗30 min。
1.4.6 预固定向细胞液中加入新配制的3.5 mL卡诺氏固定液(V甲醇∶V冰醋酸=3∶1), 并放置在0 ℃的冰盒内，预固定10 min, 4000 r/min离心10 min。
1.4.7 固定将预固定后的细胞悬液离心10 min (4000 r/min)。倒去上清液，加卡诺氏固定液至4 mL, 并用吸管轻轻吹打沉淀细胞，室温下固定15 min; 再次离心后，进行第2次固定，室温下固定30 min; 再次离心后，进行第3次固定，室温下固定30 min, 固定过程中用吸管轻轻吹打沉淀细胞。第4次离心后，向细胞沉淀中加入2~3 mL卡诺氏固定液，放入冰盒中待用。
1.4.8 滴片及染色滴片及染色与
在显微镜下对青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和E. AT各选取100个分散良好、图像清晰的中期分裂相，并统计染色体数目(图1)。用Nikon80i显微镜油镜观察并拍照。对青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和E. AT的核型各选取5个形态清晰、着丝点清楚、分散效果良好的中期分裂相。利用AJ-VERT和Photoshop软件的测量以及处理图片功能，分别测量染色体相对长度、长臂和短臂相对长度，对相对长度相近、着丝点类型相同的染色体进行配对，再将配对好的染色体进行分类、排列组型，用 Excel软件对青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和E. AT的染色体核型的各参数进行统计整理。染色体相对长度=(每条染色体长度/染色体组总长)×100, 臂指数=长臂长度/短臂长度。根据着丝点所在位置以及臂指数进行染色体类型划分[29]。
1.6 性腺切片的制备和观察杂交后代个体经称重、测量体长后解剖获得性腺，立即放入波恩氏液中固定，经24 h固定后取出经75%、85%、95%乙醇和无水乙醇梯度脱水、二甲苯透明后用石蜡包埋，用切片机连续切片，然后用苏木精-伊红(HE)染色，最后用中性树胶封片。用Nikon80i正置显微镜进行观察并拍照。
2 结果与分析 2.1 染色体数目选取100个分散良好、形态清晰的青石斑鱼细胞的染色体中期分裂相，经观察统计，染色体数目为43~48条，其中48条染色体出现的频率最高，占比为91%(表1), 表明青石斑鱼二倍体染色体众数是48, 即2n=48。选取100个不同个体的分散良好、形态清晰、数目完整的蓝身大斑石斑鱼细胞的染色体中期分裂相，经观察统计，染色体数目为44~49条，其中48条染色体出现的频率最高，其所占比例为82%(表1), 表明蓝身大斑石斑鱼细胞的二倍体染色体众数是48, 即2n=48。选取100个不同个体的分散良好、形态清晰、数目完整的E. AT细胞的染色体中期分裂相，经观察统计，染色体数目为44~49条，其中48条染色体出现的频率最高，其所占比例为 78%(表1), 表明杂交后代E. AT的二倍体染色体众数是48, 即2n=48。
2.2 染色体组组成分别对青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和杂交后代的5个中期分裂相进行镜检，并统计染色体的相对长度、臂比以及染色体类型(图1, 表2)。在青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和杂交后代细胞中没有观察到多倍体的存在。根据染色体的相对长度、着丝点位置，青石斑鱼的核型公式为2n=48, 48t, NF=48; 蓝身大斑石斑鱼的核型公式为 2n=48, 2sm+46t, NF=50; 杂交后代48 条染色体中有一条为亚中部着丝粒染色体(sm), 其余全为端部着丝粒染色体(t), 核型公式为 2n=48, 1sm+47t, NF=49。
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表1 青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和杂交后代(E. AT)的染色体数目统计 Tab. 1 Counts of the chromosomes in Epinephelus awoara, Epinephelus tukula and hybrid Epinephelus awoara (♀) × Epinephelus tukula (♂) (E. AT) |
08-0988-13-F001.jpg "点击查看原图") |
图1 青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和杂交后代(E. AT)中期分裂相及核型A. 青石斑鱼; B. 蓝身大斑石斑鱼; C. 杂交后代(E. AT). Fig. 1 The chromosomal metaphase and karyotypes of Epinephelus awoara, Epinephelus tukula and hybrid Epinephelus awoara (♀) × Epinephelus tukula (♂) (E. AT)A. E. awoara; B. E. tukula; C. E. AT. |
结果显示4尾杂交个体全为雌性(图2), 大部分发育至初级卵母细胞的第Ⅱ和第Ⅲ时相，第Ⅱ时相时卵原细胞略呈多角椭圆形或长椭圆形，处于小生长期，胞质含量多，为紫红色，在细胞质中出现卵黄核; 第Ⅲ时相时卵母细胞明显增大，大致呈圆形，正在向大生长期过渡，胞质颜色变浅，出现较大脂肪滴。这符合石斑鱼雌雄同体、先雌后雄的生理特征，因此异形染色体与性别无关。
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表2 青石斑鱼、蓝身大斑石斑鱼和杂交后代的染色体相对长度和臂比 Tab. 2 The relative length and arm ratio of chromosomes of Epinephelus awoara, Epinephelus tukula and hybrid Epinephelus awoara (♀) × Epinephelus tukula (♂) (E. AT) |
08-0988-13-F002.jpg "点击查看原图") |
图2 16月龄青石斑鱼(♀)×蓝身大斑石斑鱼(♂)杂交后代(E. AT)性腺发育状态A. 卵母细胞全部处于第Ⅱ时相; B. 卵母细胞部分处于第Ⅲ时相; OC: 卵巢腔; Ooc Ⅱ: 第Ⅱ时相卵母细胞; OocⅢ: 第Ⅲ时相卵母细胞. Fig. 2 Gonadal development of 16 months old hybrid Epinephelus awoara (♀) × Epinephelus tukula (♂) (E. AT)A. All oocytes are in phase Ⅱ; B. Some oocytes are in phase Ⅲ; OC: ovarian cavity; Ooc Ⅱ: phase Ⅱ oocyte; Ooc Ⅲ: phase Ⅲ oocyte. |
目前国内外已经对28种石斑鱼的染色体核型做了研究，石斑鱼的二倍体染色体数目都为48, 即2n=48, 因此可认为石斑鱼属基本二倍体染色体数目为48[13]。其中2n=48t的原始类群有15种，占比53.57%。这与其他海水鱼类的染色体特征相似，即端部、亚端部着丝粒较多，而中部、亚中部着丝粒相对较少[30]。石斑鱼染色体中的核仁组织区或者目测观察到具次缢痕的几乎全在第24对染色体上，这也是石斑鱼属鱼类的一个细胞遗传学特征。现有研究已发现7种石斑鱼具有染色体多态性(表3), 染色体多态现象在其他鱼类上也经常出现，1989年统计的中国淡水鱼类在染色体组型上存在差异的种类有47种[13], 2007年统计的中国海水鱼类在染色体组型上存在差异的种类共有9种[30]。随着人们对越来越多的鱼类染色体核型进行研究，具有染色体多态性的鱼类会被逐渐发现。表3对部分具此现象的鱼类进行了统计。
目前对于染色体多态现象的解释为地理隔离、实验方法不同及观测误差等原因[21,40,45,47,52-53]。核型存在多样性的鱼类大多取自不同的地点，如云纹石斑鱼[19-21]、大黄鱼[38-45]、纹缟虾虎鱼[45-46]、银白鱼[47]等，可能不同地区物种为了适应不同的自然环境，在染色体层面发生了改变，继而将性状遗传给下一代。但是在对鲑点石斑鱼[15-16]、鞍带石斑鱼[17-18]、大黄鱼[37,41]等的核型研究中，发现取自同一地点附近的样本也会出现染色体多态现象，本研究的蓝身大斑石斑鱼的染色体核型结果与已有报道[12]不同(2n=48t, NF=48), 但是取样地点相似，出现这种现象的原因多为研究人员未选择分散较好的中期分裂相，主观误差较大。综合分析认为，染色体多态现象产生的主要原因为同种自然隔离、亲缘相近物种之间的遗传物质交换、近缘种和远缘种间杂交等; 同时，研究人员的观测误差也会导致最终染色体核型差异。
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表3 鱼类染色体多态现象 Tab. 3 Chromosome polymorphism in fish |
本研究开始时用10尾4月龄鱼的头肾混合制备染色体制片，结果发现杂交青石斑鱼有两种染色体核型: 第一种核型不具异形染色体，占比28.89%, 核型公式为2n=48t, NF=48; 第二种具异形染色体，占比71.11%; 核型公式为2n=1sm+47t, NF=49(未报道)。在后续的验证实验中，对每尾16月龄的E. AT单独制备染色体制片，发现对于同一尾鱼的中期分裂相，有时能观察到异形染色体，有时观察不到，而未观察到异形染色体的原因为异形染色很小观察不清，核型分散不清晰。4月龄E. AT的中期分裂相中观测到异形染色体的情况也是由于观察误差导致。因此，今后在核型研究中应尽可能明确实验鱼所在的原始水域，详细记录实验步骤，选择分散非常好及形态清晰的中期分裂相，以及每尾鱼单独制备，从而减少对染色体多态性分析的干扰，获得严谨准确的结果。
3.2 杂交后代异形染色体形成原因探究本研究中作为母本的青石斑鱼的染色体核型为2n=48, 48t, NF=48; 作为父本的蓝身大斑石斑鱼的染色体核型为2n=48, 2sm+46t, NF=50; E. AT的染色体核型为2n=48, 1sm+47t, NF=49。这与其他杂交后代染色体核型具有相似的特点，即杂交后代的染色体核型大多介于父母本核型之间或与父母本相似，如棕点石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交后代(E. fuscoguttatus♀×E. lanceolatus♂)[7]、云纹石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交后代(E. moara♀×E. lanceolatus♂)[8]、彩鲷(♂)×美洲虎鲷(♀)杂交后代(Heros managuense♀×Cichiasoma trimaculatum♂)[54]、大口鲇(♀)×怀头鲇(♂)杂交后代(Silurus meridionalis♀× S. soldatovi♂)[55]、小黄鱼(♀)×大黄鱼(♂)杂交后代(Larimichthys polyactis♀×L. crocea♂)[56]、红鳍笛鲷(♀)与千年笛鲷(♂)杂交后代(Lutjanus erythropterus♀×L. sebae♂)[57]等; 也有较多杂交后代出现染色体缺失或三倍体现象，如马苏大麻哈鱼(♀)×虹鳟(♂)杂交后代(Oncorhynchus masou♀×O. mykiss♂)[58]、夏鲆(♀)×褐牙鲆(♂)杂交后代(Paralichthys dentatus♀×P. olivaceus♂)[59]、赤眼鳟(♀)×鳙(♂)杂交子代(Squaliobarbus curriculus♀×Aristichthys nobilis♂)[60]等。
目前在国内外报道的28种石斑鱼的染色体核型的研究中，仅在拟青石斑鱼中发现异形染色体，其核型为2n=1st+47t[10], 除此之外其余石斑鱼的染色体都为成对存在。本研究中青石斑鱼的染色体核型与前人的研究结果一致[10-11], 而蓝身大斑石斑鱼的染色体核型与前人的结果不同[12], 但E. AT的染色体核型以及其与父本相似的臂比从侧面验证了其父本核型应为2n=2sm+46t。从杂交后代E. AT染色体核型推测，父本提供了23条端部着丝粒染色体和1条亚中部着丝粒染色体，母本提供了24条端部着丝粒染色体，从而形成了异形染色体。这与王世锋[10]对拟青石斑鱼异形染色体的成因推测相似，即拟青石斑鱼可能是青石斑鱼和赤点石斑鱼在早期分化过程中杂交而形成的一个种，保留了一条赤点石斑鱼的亚中部着丝粒染色体。但赤点石斑鱼的臂比与拟青石斑鱼相差较大，且王云新等[14]得到的赤点石斑鱼的核型无亚中部着丝粒染色体，因此拟青石斑鱼异形染色体的形成原因仍待探究。
在国内外对鱼类的核型研究中，异形染色体大多都与性别相关，只在10%左右的鱼类中发现性染色体[61]。性别为XX/XY决定的鱼类较为常见，如胡子鲇属(Clarias)[62-64]、斑头鱼(Agrammus agrammus)[65-66]; 性别由ZZ/ZW决定的鱼类有星康吉鳗(Conger myriaster)[67]、大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)[68]等; 性别由ZO/ZZ决定的鱼类有短颌鲚(Coilia brachygnathus)[69]、刀鲚(Coilia nasus)[70]等; 性别为X1X1X2X2/X1X2Y决定的鱼类有棘头梅童鱼(Collichthys lucidus)[71]、五线笛鲷(Lutjanus quinquelineatus)[72]、丝背细鳞鲀(Stephanolepis cirrhifer)[73]等。而石斑鱼为雌雄同体，雌性先熟，并在达到一定年龄及大小时发生性逆转现象，由雌性变为雄性[74-76], 如浙江北部沿海青石斑鱼体长250~340 mm时，雄鱼仅占总个体数的6%~23%, 350 mm时，雄鱼占50%左右，370 mm时，雄鱼占85%以上，420 mm以上几乎全是雄鱼[77]。Ruiz[78]在对雌性、雄性以及间性细斑石斑鱼(E. guttatus)的染色体核型进行研究中发现，不同性别的细斑石斑鱼染色体核型相同，没有异形性染色体，性别分化属基因水平，还未达到染色体水平。本研究中4尾E. AT的性腺切片结果初步说明E.AT在性分化前全为雌性，所以E. AT的异形染色体仅仅是因为父本为其提供了一个亚中部着丝粒染色体，与性别无关。杂交种拥有与亲本不同的性状，如珍珠龙胆石斑鱼和云龙石斑鱼都具有生长快等杂种优势[79-80], 本研究中E. AT也在成活率和生长速度上具有杂种优势[4]。虽然E. AT的异形染色体与性别无关，但是其杂种优势与染色体之间存在何种关系仍需要继续探究，从而为杂交石斑鱼优良性状选育，新种质培育和遗传性状分析提供生物学基础。
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