准确评估海洋生物多样性是渔业管理和生态保护的基础，而采样设计的优化对提升物种丰富度估计精度至关重要。本研究基于2014年8月至2015年5月广东近海四季底拖网调查数据，采用计算机模拟重抽样技术，对比分析简单随机采样（SRS）与分层随机采样（StRS）在不同站点数和采样频次下对鱼类物种丰富度估计的影响。结果表明，物种丰富度探测率在低采样站点数时呈现快速上升趋势，但随着站点数量的增加，其增速逐渐减缓。达到90%的物种探测率，全年四季采样需44个需采样站点；实现80%探测率，三季采样夏–秋–冬或夏–秋–春组合所需站点数最少，为36个。相对估计误差（REE）和相对偏差（RB）的绝对值均随站点数增加而递减。StRS的REE和RB绝对值显著低于SRS（p<0.05）。剔除稀有种后，达到90%探测率所需的样站点数减少至20个，且REE和RB绝对值也显著降低（p<0.05），表明稀有种的存在增加了抽样变异性。15种采样组合的分层采样设计效应（De）均小于1，表明StRS在广东近海渔业资源调查中具有更高的采样效率，尤其在采样站点数较少时更为明显。本研究为优化广东近海渔业资源调查的采样设计提供了科学依据，建议根据监测精度需求与成本约束，合理选择站点数与季节组合。